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2020年銀水灣論壇—非洲豬瘟系列檢測技術(shù)與疫苗研發(fā)的進展及 實驗室檢測在非洲豬瘟防控中的作用


5月15日,由哈爾濱國生生物科技股份有限公司主辦的銀水灣論壇網(wǎng)上課堂開講啦。第一節(jié)課由中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所豬傳染病研究室主任、豬烈性傳染病創(chuàng)新團隊首席科學家仇華吉研究員給大家?guī)怼蹲咴诓《厩懊?---實驗室檢測在非洲豬瘟檢測中的作用》。

仇老師主要從事豬瘟、非洲豬瘟和偽狂犬病等烈性傳染病的基礎(chǔ)和應(yīng)用研究。先后主持國家863項目、國家十三五重點研發(fā)項目、國家自然科學基金重點項目等20余項,以通訊作者發(fā)表SCI收錄論文70余篇,獲國家科技進步二等獎2項、黑龍江省科技進步一等獎3項、國家發(fā)明專利9項、農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全證書2個,主編或參編學術(shù)專著8部。

非洲豬瘟自2018年進入中國,已經(jīng)在我國擴散和流行近兩年時間?,F(xiàn)在這個病大面積已經(jīng)被控制住了,但是在局部地區(qū)還呈現(xiàn)區(qū)域性的散發(fā)或者地方性的流行。本次網(wǎng)上講堂特邀仇華吉研究員給我們講述非洲豬瘟系列檢測技術(shù)與疫苗研發(fā)的進展及實驗室檢測在非洲豬瘟防控中的作用等一系列問題。下面讓我們走進仇老師的課堂。

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仇老師給大家細致的分析了當前養(yǎng)豬業(yè)的形勢:目前我國種豬缺口比較大,產(chǎn)能有限,恢復正常生產(chǎn)性能仍要一段時間;生豬的存欄量處于一個較低水平,總體市場供應(yīng)呈現(xiàn)出一種供不應(yīng)求的情形,因此豬肉價格整體來說還是會緩慢的上漲。

仇老師指出目前國家對于養(yǎng)豬業(yè)的任務(wù)要求:到2020年底,我國農(nóng)業(yè)部要求我國的生豬存欄量恢復到疫情前的80%,選取一部分肉豬(三元母豬)進入種豬行列,盡快恢復產(chǎn)能,養(yǎng)豬業(yè)是我們國家“穩(wěn)產(chǎn)保供”的一個政治任務(wù),這是一個民生課題,是關(guān)系國家國計民生的大事。


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那么,對于非洲豬瘟大家是如何看待的呢?仇老師表示,科學家以及養(yǎng)殖戶經(jīng)過一年多與非洲豬瘟的較量,已經(jīng)對它有了科學的認識,少了最初爆發(fā)時的恐懼,只要依靠生物安全技術(shù)以及科學的精細化管理,另外在資金、技術(shù)、人才方面有一定的保障,非洲豬瘟是可防可控的。


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我們國家養(yǎng)豬業(yè)是一個系統(tǒng)工程,所以防控非洲豬瘟更應(yīng)該注重的是在品種、營養(yǎng)、環(huán)境、管理、防疫等方面的綜合實力。仇老師向大家分享了科學的“防非戰(zhàn)略”:篤定決心、堅定信心,系統(tǒng)思維、綜合防控,科學決策、精準施策,實事求是,與時俱進;以及“防非策略”:控制傳染源頭,降低病毒載量,提升感染閾值,維持陰性群體。防非的重點主要在于防控,仇老師告誡我們應(yīng)當重點關(guān)注防控非洲豬瘟的三個重要環(huán)節(jié):阻斷病毒源頭,降低病毒載量,提高豬只耐受性。

現(xiàn)在新冠肺炎疫情后的復工復產(chǎn)已基本開始了,一些豬場陸續(xù)開始復養(yǎng)。為了使大家復養(yǎng)成功,仇老師講解了復養(yǎng)的程序主要有以下幾個方面:①復養(yǎng)前,進行風險評估,評估豬場所在位置的大環(huán)境。②豬場硬件設(shè)備升級改造,對豬場制度流程的完善。③定期全面洗消(消毒-清洗-消毒-干燥-熏蒸)。④科學、全面的取樣、采樣。⑤哨兵豬的選取。⑥技術(shù)人員持證上崗,系統(tǒng)培訓,定期考核。⑦全面復養(yǎng),持續(xù)檢測。⑧制定應(yīng)急預案,并反復演練。

仇老師強調(diào),科學復養(yǎng)的過程其實并不難,但是復養(yǎng)完成后,更應(yīng)該引起我們重視的是如何避免病毒再次光臨豬場呢?仇老師表示,要通過實驗室檢測,實驗室檢測就像國防雷達系統(tǒng)一樣,是養(yǎng)豬人的眼睛,大家肉眼是看不到病毒的活動跡象的,但是可以借助科學的生物安全監(jiān)測,包括風險預警、洗消效果評價、生物安全流程優(yōu)化、精準清除復養(yǎng)前評估等。

仇老師向我們介紹了實驗室常用的非洲豬瘟檢測方法,分為核酸檢測、抗原檢測和抗體檢測。仇老師有細致的分析了不同的檢測方法的各優(yōu)缺點。如下表所示。


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實驗室檢測非洲豬瘟的試劑盒,仇老師具體介紹了兩種熒光PCR試劑盒:普通型和免提取型。同時與其他試劑盒的各個參數(shù)進行了比較,為大家選取適合自己豬場的試劑盒提供參考。另外還有敏感性比較好的抗原抗體檢測方法可供大家選取。


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如果大家擔心遇到非洲豬瘟和豬瘟兩種不同傳染病交叉感染的情況時,不要慌!仇老師向我們系統(tǒng)的講解了非洲豬瘟和豬瘟雙重熒光定量PCR的方法,非洲豬瘟敏感性為每微升10拷貝,而豬瘟的檢測限可達每毫升10 TCID50。


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各種實驗室檢測的原理、方法,仇老師已經(jīng)全面的向大家展示了,但是為了在檢測時不出現(xiàn)污染的情況,仇老師告誡我們,實驗室檢測布局也是獲取正確的實驗結(jié)果所必須的,實驗室檢測布局要做到實驗功能分區(qū),樣品處理、核酸提取、加樣、PCR擴增等不同區(qū)域單向流動,互不交叉;在做完實驗后要對實驗區(qū)域進行消毒,保證后續(xù)實驗順利進行;實驗過程要進行生物安全措施,對樣品進行無害化處理;定期對實驗室環(huán)境進行評估,以及各種污染治理。


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檢測前,科學合理的采集樣品也是保障實驗室檢測順利進行的一個重要環(huán)節(jié),而且仇老師也著重強調(diào)了,采樣不僅僅只是在豬場內(nèi)外環(huán)境,還要對人員及運輸車輛入場前、洗消烘前后進行采樣,對于高風險豬可以采樣后再進行無害化處理,為后續(xù)防控提供依據(jù)。

檢測后,對實驗結(jié)果出現(xiàn)假陽性和假陰性怎么辦?別急,仇老師分析原因可供大家參考:①檢測方法/試劑盒的特異性和敏感性差;②環(huán)境污染(氣溶膠污染、人員流動造成交叉污染、儀器消毒不徹底等);③采樣不規(guī)范,樣品處理或保存不當,樣品中含有其它雜質(zhì)等;④核酸提取/PCR擴增失??;⑤病毒基因組發(fā)生變異。

仇老師表示,避免出現(xiàn)這些假陽性和假陰性的實驗結(jié)果,就要提高實驗室檢測的準確性,可以從以下幾個方面注意:①技術(shù)人員定期培訓;②優(yōu)化實驗流程方案;③設(shè)立對照組;④選擇特異性好,靈敏度高的檢測試劑盒;⑤選擇實驗最適合的檢測方法;⑥PCR實驗室環(huán)境污染監(jiān)控,監(jiān)控頻率要每周1至2次。

隨后,仇老師給大家介紹了實驗室常見的檢測誤區(qū),包括:檢測與臨床的脫節(jié)、實驗室設(shè)計不合理、采樣設(shè)計不科學、檢測滯后、混淆診斷性樣本和篩查性樣本、分不清診斷性檢測和風險評估、對檢測方法的優(yōu)缺點認知不清等一系列實驗室常見問題;并著重對并聯(lián)檢測和串聯(lián)檢測進行講解。


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最后仇老師在直播間進行了答疑,解決了大家的問題,非常感謝仇老師為大家解答疑惑。這一次課堂仇老師系統(tǒng)全面的從當前養(yǎng)豬業(yè)的形勢和任務(wù)、對非洲豬瘟的科學認知、防非的系統(tǒng)思維、非洲豬瘟防控關(guān)鍵點、非洲豬瘟疫情后的復養(yǎng)程序和實驗室檢測各個方面進行系統(tǒng)的闡述,為非洲豬瘟疫情后我國養(yǎng)殖戶恢復豬只飼養(yǎng)提供了全方位的指導,希望能給大家?guī)韼椭?。最后,再次感謝仇華吉研究員的精彩分享!

 

銀水灣論壇:             

自2016年以來,《銀水灣論壇》已成功舉辦四屆。論壇由哈爾濱國生生物科技股份有限公司(動物用生物制品國家工程研究中心)與股東單位哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司、哈藥集團生物疫苗有限公司共同主辦,中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所、中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所、北京中海生物科技有限公司協(xié)辦。

四年來,本著“引領(lǐng)中國獸用生物制品產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新與融合發(fā)展,構(gòu)建公益性平臺的辦會宗旨”,匯聚行業(yè)精英各抒己見,聚焦行業(yè)健康發(fā)展共商良策,力求從不同視角、更高角度為行業(yè)同仁們提供一個展示與交流的平臺,促進行業(yè)技術(shù)進步,《銀水灣論壇》已成為在業(yè)內(nèi)享有較高盛譽和影響力的行業(yè)盛會。

《銀水灣論壇》網(wǎng)上課堂會繼續(xù)秉持“創(chuàng)新、融合、發(fā)展”的精神,邀請業(yè)內(nèi)大咖做客直播間,為大家構(gòu)建便捷、有效、公益性的前沿知識學習平臺。

企業(yè)介紹:

哈爾濱國生生物科技股份有限公司(動物用生物制品國家工程研究中心,以下簡稱國生生物)是經(jīng)國家發(fā)改委批準,由中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所牽頭,聯(lián)合中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所等企事業(yè)單位共同組建、具有獨立法人資格的科技型高新技術(shù)企業(yè),是動物生物制品行業(yè)內(nèi)唯一的國家級工程研究中心。形成了從動物生物制品的研發(fā)、孵化、轉(zhuǎn)化到生產(chǎn)和銷售的全產(chǎn)業(yè)鏈,建立了多個開放性技術(shù)平臺,成為國內(nèi)領(lǐng)先的動物生物制品新產(chǎn)品的創(chuàng)新基地、孵化基地和示范性生產(chǎn)驗證基地。

牧科傳媒 陳靜整理